Rett综合征( RTT )

一、科学背景

Rett综合征( Rett syndrome ,RTT ) 是一种神经系统发育异常性疾病，主要累及女孩，是导致女性智力低下的主要原因之一。女孩发病率大约为 1/1000~1/1500。典型RTT的临床特征为：出生后 6～1 8个月生长发育基本正常，随后出现神经发育停滞或倒退，丧失已获得的技能(如手的功能、语言等)，头围增长缓慢，呼吸异常，出现手的刻板动作(如搓手、绞手、吃手等)，伴有孤独症样行为，此外，惊厥发作也是常见症状之一，到疾病后期还可能出现骨骼改变、脊柱侧弯及强直等。

研究证实，8 0%～9 0%的典型RTT患儿存在甲基化CpG结合蛋白2（MECP2）基因突变，在不典型RTT患儿中，该基因的突变率为2 0%～4 0%。人类 MECP2基因位于Xq28，基因全长7 6 k b ，包括5端非翻译区、4个外显子以及3端非翻译区。MECP2基因具有3个显著特征：(1)内含子2很大，达6 0 k b； (2) 3端非翻译区长达8.5 k b ，域含有高度保守序列及数个多聚腺苷酸位点； (3) 与上游最近的基因有长达4 0 k b的间距。

RTT患者中MECP2基因的常见的突变包括点突变、缺失、插入等。其突变多发生于外显子3和4，外显子1突变较为少见 ,不到1%的RTT患者存在外显子1区域的突变，外显子2的突变则更为少见。

二 检测方法说明

（1）MECP2基因4个外显子及其邻接的内含子区域进行扩增，并对PCR产物进行正反向测序，检出突变后再对其家系中其它成员的相应外显子区域测序分析。

（2）多重探针连接反应（MLPA），针对PCR扩增测序未检出突变的患者检测，检出MECP2基因大片段缺失和重复。

（3）实时定量PCR、长链PCR及测序，针对MLPA已检出的突变，根据其提供的大致突变范围，通过实时定量PCR、长链PCR及测序，进一步验证并确定突变的具体位置。

三 采样对象及采样要求

（1）采样对象：患者及父母。
（2）采样：采样时无需空腹等特殊要求。
（3）样品类型：检测者新鲜外周静脉血4毫升，或者新生儿足跟血片。
（4）容器：基因检测--EDTA抗凝管（紫帽）。
（5）标签：每个样品必须注明采样对象的姓名。
（6）样品拒收：不适当容器，容器破碎，外泄污染。样品标记不明，无法辨认样品标签信息。
（7）样品保存：冷藏4℃保存，常温24小时内送达