X连锁慢性肉芽肿(X—CGD)

一、 科学背景

慢性肉芽肿是一种少见的遗传性疾病，可分为X连锁CGD(X—CGD)和常染色体隐性遗传CGD。CGD的主要临床特征为：幼年起病，常以反复发作的致命性细菌或真菌感染为突出表现。感染主要发生在淋巴结、皮下组织、肺、肝和胃肠道等，过度的炎症反应逐渐形成肉芽肿，导致肠炎、生殖道阻塞和伤口长期不愈等。轻者也可在青少年或成年后发病。CGD的发病率约为1／20万人。

CGD患儿存在着还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶复合物的某些成分缺失或减少，不能有效地产生具有杀菌活性的超氧阴离子及其代谢产物，从而吞噬细胞无法产生“呼吸爆发”

X-CGD是最常见的类型，约占所有CGD病例的60％-65％。其病因是编码NADPH 亚单位gp91-phox蛋白的CYBB基因突变，该基因位于染色体短臂2区1带1亚带(xp21．1)，长30kb，含13个外显子，编码570个氨基酸。其编码的氨基酸共包含4个结构域：1-277个氨基酸为N端，其作用可能与血红素结合及与p22一phox相互作用有关；278—397个氨基酸为黄素腺瞟呤二核苷酸(FAD)结合区，398～483和504—570个氨基酸为NADPH结合区；484～507个氨基酸为跨越ADPH结合区的环结构。任何一个结构域的基因突变都可以引起X-CGD，而且突变的频率与结构域的长度是成比例的(N端结构域为6l％，FAD结合区为20％，NADPH结合区为17％，环结构为2％)。

X-CGD的基因突变常是多样性的，大多为外显子部位大片段碱基对的缺失、小片段碱基对的缺失或插入、错义突变和无义突变等，还有少部分突变位于拼接位点或5’调节区域以及内含子部位的突变。目前已有300多种CYBB基因突变被登记收入国际X-CGD数据库。

二 检测方法说明

对患者CYBB基因的13个外显子及其邻接的内含子区域进行扩增,并对PCR产物进行正反向测序，检出突变后再对其家系中其它成员的相应外显子区域测序分析

三 采样对象及采样要求

（1）采样对象：患者及父母。
（2）采样：采样时无需空腹等特殊要求。
（3）样品类型：检测者新鲜外周静脉血4毫升，或者新生儿足跟血片。
（4）容器：基因检测--EDTA抗凝管（紫帽）。
（5）标签：每个样品必须注明采样对象的姓名。
（6）样品拒收：不适当容器，容器破碎，外泄污染。样品标记不明，无法辨认样品标签信息。
（7）样品保存：冷藏4℃保存，常温24小时内送达